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          化學發(fā)光
          
						
          
					
          					
					 
           
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          化學發(fā)光范文第1篇
           
           1 化學發(fā)光免疫分析技術的研究歷史背景
           
           免疫分析的發(fā)展伴隨著抗體制備技術的改進而不斷提高。美國科學家Yalow等人首先將標記技術引入免疫分析，他們首先用放射免疫分析法(RIA)進行測定胰島素。由于這種試驗方法限制了試劑的壽命，難以獲得長期穩(wěn)定的檢測標準，同時由于存在同位素的使用，不僅會損害操作人員身體健康，也會帶來污物處理困難的問題。為了找到更為合理的免疫分析法成為以后20年來研究的熱點。直到70年代末，國外有學者將免疫反應與化學發(fā)光測定技術相結合，這種集高靈敏度和高特異性的技術稱之為化學發(fā)光免疫分析法，化學發(fā)光免疫技術優(yōu)勢比較明顯，主要有以下幾點：第一，靈敏度高，檢測限范圍更精準;第二，自動化程度高，并且沒有放射性輻射危害;第三，發(fā)光標記物穩(wěn)定，有效期長，同時應用范圍寬，對于分子大小不同的抗原、半抗原及抗體都可檢測。因此，化學發(fā)光免疫分析在臨床、衛(wèi)生、食品、環(huán)保和軍事等領域正被越來越多地用于激素、蛋白質、腫瘤、毒物、病毒等成分檢測。
           
           2 免疫分析基本原理
           
           由免疫反應系統(tǒng)和化學發(fā)光分析系統(tǒng)兩個關鍵部分組成了化學發(fā)光免疫分析的基本原理，化學發(fā)光分析系統(tǒng)主要氧化以及催化的作用于化學發(fā)光物質，產生一個激發(fā)態(tài)的中間體，在處于穩(wěn)定狀態(tài)時，發(fā)射出光子，然后通過測量儀器測量光量子。通過標記物與發(fā)光強度的關系，進而測出被測物質含量。而免疫反應系統(tǒng)是將發(fā)光物質在抗原或抗體上直接標記。
           
           3 化學免疫分析分類
           
           化學發(fā)光免疫分析法主要以標記法的不同來進行分類，目前習慣上將免疫分析法主要分為兩類，第一主要是標記免疫分析法，其次是酶免疫分析法，前者是以化學發(fā)光標記，后者是以酶標記，以化學發(fā)光底物作為信號試劑來進行發(fā)光，其原理是不相同的。除此之外，包括熒光免疫分析法以及電化學發(fā)光免疫分析法也是目前存在的化學免疫法分析方法。
           
           3.1 化學發(fā)光標記免疫分析
           
           將化學發(fā)光劑如吖啶酯類化合物，直接標記在抗原上或抗體上，其基本原理是啟動發(fā)光劑發(fā)光，快速閃爍。這種標記物其化學反應簡單、快速、無須催化劑;夾心法用于大分子抗原，競爭法主要用于檢測小分子抗原，另外本底低，非特異性結合相對較少光量不會因為分子大小而受影響，因此能增加靈敏度，一般常用的化學發(fā)光物質主要是通過啟動發(fā)光試劑NaOH-H2O2作用而發(fā)光，其發(fā)光非常迅速，小分子物質多采用競爭法，夾心法主要用于大分子物質。
           
           3.2 化學發(fā)光酶免疫分析
           
           通過酶標記生物活性物質，再作用于發(fā)光底物，在信號劑的作用下發(fā)光，然后用發(fā)光測定儀進行測定。化學發(fā)光酶免疫分析酶反應的底物是發(fā)光劑，按照標記免疫分析，應屬酶免疫分析，其操作步驟與酶免分析完全相同。目前常用的標記酶為堿性磷酸酶和辣根過氧化物酶，它們有各自的發(fā)光底物。化學發(fā)光酶免疫分析法種類大致有三種，首先是HRP標記CLEIA，一般常用3-氨基鄰苯二甲酰肼作為底物，也即是魯米諾或者用其衍生物4-氨基鄰苯二甲酰肼也是可以的，這兩種都是重要的發(fā)光試劑。需要注意的是該底物需要在堿性緩沖溶液中進行氧化反應，生成激發(fā)態(tài)中間體，當然這需要在過氧化物酶及活性氧存在的條件下進行，中間體回到基態(tài)時就可以發(fā)光，此時的波長一般在425nm。曾經先前有人用該標記底物標記抗原或抗體，但后來發(fā)現(xiàn)其發(fā)光強度多受靈敏度的影響。目前用過氧化物酶進行標記，其發(fā)光強度主要依賴酶免疫反應中的酶的濃度大小;其次增強發(fā)光酶免疫分析也是化學發(fā)光酶免疫分析的一種，它主要是在將增強的發(fā)光劑加入到發(fā)光系統(tǒng)中，加強發(fā)光的信號強度，并且能夠保持長時間的穩(wěn)定性，在一定程度上提高了該分析方法的準確性和靈敏度，便于多次測定。目前在一些現(xiàn)代化的設備上，還可以由計算機進行精確控制操作，比如，往系統(tǒng)中加入發(fā)光試劑以及混合、溫育、洗滌等，甚至后期的數(shù)據處理，進而繪制標準曲線，最終完成患者血清樣品的分析并打印出結果;最后一種就是用ALP標記的CLEIA，這種分析方法一般多用環(huán)-1，22-二氧乙烷衍生物作為發(fā)光底物，它的發(fā)光原理主要是其用化學發(fā)光酶免疫分析底物而設計的分子結構穩(wěn)固，其中的芳香基作為發(fā)光基團和酶作用，在發(fā)光試劑的作用下發(fā)光，該底物在堿性磷酸酶的作用下，磷酸酯基發(fā)生水解而脫去一個磷酸基，就會產生一個穩(wěn)定的中間體，然后中間體發(fā)生裂解會產生金剛烷酮和激發(fā)態(tài)的物質，這種常見底物是AMPPD，其作為磷酸酯酶的直接化學發(fā)光底物，多用來檢測堿性磷酸酯酶和一些配基的結合物。
           
           4 應用
           
           4.1 激素、蛋白質和腫瘤檢測
           
           該系統(tǒng)使反應物形成均相混懸液，順磁微粒作為固定相，增大反應面積，加速免疫反應，快速分離，自動洗滌，減少酶和催化劑的使用，pH調整即可，避免了許多影響因素，廣泛應用于甲狀腺功能、藥物檢測、腫瘤標志物及心血管等項目。
           
           4.2 病毒、毒物檢測
           
           楊秀岑等用ABEI標記兔抗大腸桿菌lgG，試樣溫育、離心、沉淀峰值用luminol-H2O2-NaOH 發(fā)光體系測定;章竹君等測定了糞樣中的輪狀病毒以HRP酶標記;為研究TNT對人體的毒害作用提供方法，張麗民等以HRP標記免疫測定了血清中4-氨基-2，6-二硝基甲苯，效果非常顯著。
           
           4.3 其他方面的應用
           
           被越來越多地用于免疫測定中的HRP酶標記生成核酸探針，主要采用兩種形式，一種是靶DNA雜交，將HRP直接標記在探針上，同時增強的魯米諾試劑檢測加入分離后的雜交體。另外一種是將DNA探針標記在生物素及地高辛上，然后與靶DNA雜交，再用HRP標記的親和素和抗地高辛與分離后的雜交體結合，最后加入魯米諾試劑氧化發(fā)光。
           
          化學發(fā)光范文第2篇
           
           【摘要】化學發(fā)光分析是根據化學反應產生的光輻射強度確定物質含量的一種痕量分析方法，這種技術日益得到重視，它靈敏度高，線性范圍寬，不需要外來光源，儀器設備簡單，操作方便，分析快速快，易實現(xiàn)自動化，價格便宜，選擇性強。常用的化學發(fā)光技術有電化學發(fā)光、化學發(fā)光免疫分析、微粒子化學發(fā)光等。本文主要探析此技術在臨床檢驗中的應用。
           
           【關鍵詞】化學發(fā)光 分類 臨床應用
           
           化學發(fā)光(chemiluminescence，CL)早在19世紀80年代就得到證實，即在化學反應過程中瞬間以釋放光子的形式放出能量。化學發(fā)光法因其靈敏度高、線性范圍寬和分析速度快等優(yōu)點，已在醫(yī)學檢驗中得到廣泛地應用。
           
           一 化學發(fā)光的基本內涵
           
           化學發(fā)光分析法是近30年來發(fā)展起來的一種高靈敏的微量及痕量分析法，化學發(fā)光分析具有靈敏度高、線性范圍寬、不需要外來光源、分析速度快、儀器設備相對簡單、便宜等優(yōu)點。化學發(fā)光分析測定物質的方式可分為直接法和間接法。化學發(fā)光分析反應類型可分為酶促反應和非酶促反應兩類。此外化學發(fā)光分析法可以與其他分析技術聯(lián)用，如流動注射分析、電化學分析、免疫分析、固定化試劑技術、傳感器技術等分析技術相結合。
           
           二 常用的化學發(fā)光技術
           
           首先，電化學發(fā)光。該技術是通過對電極施加一定的電壓進行電化學反應而發(fā)光，通過測量化學發(fā)光光譜和強度來測定物質含量的一種痕量分析方法。它將電分析化學手段和化學發(fā)光方法相結合，具有獨特的優(yōu)點，如重現(xiàn)性和靈敏度進一步提高，在多種組份同時存在時，可施加不同波形、不同電壓的信號進行選擇性測量等，是潛在的分析手段之一。
           
           第二， 化學發(fā)光免疫分析是以標記發(fā)光劑為示蹤物信號建立起來的一種非放射標記免疫分析法，具有靈敏度高、線性范圍寬、儀器設備簡單、操作方便、分析速度快和容易實現(xiàn)自動化等優(yōu)點。魯米諾、異魯米諾及其衍生物、吖啶酯衍生物、辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶是目前化學發(fā)光免疫分析中使用最多的標記物。
           
           第三，微粒子化學發(fā)光是化學發(fā)光免疫分析的特殊形式，是以化學發(fā)光劑為底物的酶免疫技術，同時應用了磁性微珠做固相載體，增加了吸附面積，使抗原抗體最大限度的結合。微粒子化學發(fā)光技術所需標本量極少，孵育時間大大縮減，同時因其選擇性吸附抗原，從而提高了特異性、靈敏性，使測定結果準確、可靠，并減少污染。
           
           第四，化學發(fā)光生物傳感器是通過非創(chuàng)傷或非損傷性的辦法，連續(xù)、實時、動態(tài)地檢測生物體內的某一種或幾種物質濃度的技術。特別是化學發(fā)光免疫傳感器是將具有分子識別作用的抗原或抗體以適當?shù)姆绞焦潭ɑ瞥桑Y合了化學發(fā)光高靈敏度和抗原抗體特異性結合的高度專一性以及無污染等特點，是替代放射免疫分析的重要分析工具，已日益受到重視。
           
           三 化學發(fā)光分析在臨床實驗室中的應用
           
           第一，化學發(fā)光法與血液系統(tǒng)疾病，化學發(fā)光免疫分析在測定G一CSF上是敏感的，可用于測定正常人或疑有G一CSF減少疾病的患者血清G一CSF，對于預測免疫抑制劑治療再障的效果有一定的作用。例如，慢性骨髓增生性疾病，如慢性髓性白血病和真性紅細胞增多癥(Pv)是與中性白細胞功能失常有關的。Pv的PMN在用趨化膚(fMLP)刺激后化學發(fā)光值及丁量減少.這與磷醋酶D活性受損有關。而沒有或用PMA刺激的化學發(fā)光值及了量是正常的。慢性髓性白血病患者也可觀察到這個現(xiàn)象，但程度更小。
           
           第二，化學發(fā)光法與消化系統(tǒng)疾病。幽門螺桿菌(HP)在慢性胃炎和消化性潰瘍的發(fā)病中起著重要作用。病理組織學研究顯示已感染HP的胃粘膜具有吸引中性白細胞積聚的特點。在魯米諾增強的化學發(fā)光反應土表現(xiàn)為增強；潰瘍性結腸炎患者結腸粘膜面雖然有中性白細胞浸潤.但有人發(fā)現(xiàn)潰瘍性結腸炎患者和正常人相比，在發(fā)光的峰值、峰時、斜率方面無明顯差異。僅27%具有活動性潰瘍性結腸炎患者刺激物有增高的化學發(fā)光。可能的原因是在這些患者中性白細泡不起主要作用或者不呈高活動性。慢性肝病(特別是肝癌時)0:的產生和HZOZ一MPO一CL一系統(tǒng)是抑制的。依賴Cypridina蟲熒光素類的化學發(fā)光及依賴魯米諾的化學發(fā)光均是降低的。但是慢性肝炎由于體內免疫復合物含量的增高而誘導發(fā)光增強，與正常組相比基礎化學發(fā)光增強。急性肝炎由于體內免疫復合物增加不明顯，吞噬細胞應答能力及血清調理活性均未明顯受損。因此，急性肝炎的基礎發(fā)光、峰時、斜率與正常人相比變化不明顯，但單位PMN峰值低于正常，說明急性肝炎中性粒細胞的吞噬功能也降低；
           
           第三，化學發(fā)光法可以準確檢測心血管疾病。例如，急性心肌梗時，中性粒細胞的化學發(fā)光值逐漸升高且與CK山條高度相關。因此，可通過患者PMN一CL的變化估計病情。冠心病心絞痛時化學發(fā)光值是升高的。
           
           第四，化學發(fā)光法與內分泌疾病。首先，甲狀腺疾病。甲狀腺激素是臨床許多疾病(尤其是甲狀腺疾病)診斷常用的指標。甲狀腺激素(TH)具有抗氧化作用，這種作用可能是由于中性白細胞特異的受體一配體相互作用引起的。TH的抗氧化作用可通過魯米諾增強的化學發(fā)光法測定，化學發(fā)光值表現(xiàn)為抑制。第二，糖尿病。患者由于可溶性或顆粒性因素激活多形核白細胞(PMN)膜上的NADPH氧化酶產生超氧陰離子自由基，然后轉變?yōu)檫^氧化氫和輕自由基。糖尿病患者分離的PMN的基礎化學發(fā)光值與正常人相比明顯升高。但當NADPH氧化酶被抑制或磷酸己糖旁路被阻斷，則糖尿病組及正常組的化學發(fā)光值均受到不同程度的抑制。NO可用多種方法測定，但化學發(fā)光法是其中最為理想的一種。NO本身不產生化學發(fā)光，當它與超氧陰離子反應時可產生很強的光，外源的精氨酸加入反應系統(tǒng)中，化學發(fā)光值會更顯著地提高。糖尿病患者的化學發(fā)光值還可體現(xiàn)循環(huán)免疫復合物的水平。具有高循環(huán)免疫復合物的患者，化學發(fā)光值也高。
           
           參考文獻
           
           ［1］ 何建文.中國實驗臨床免疫學雜志，1991年第6期。
           
           ［2］ 游利.化學發(fā)光在臨床檢驗中的應用［J］.國外醫(yī)學臨床生物化學與檢驗學分冊，1998年第3期。
           
           ［3］ StephenAreher.FasebJb.1993，7(2):349一360
           
           ［4］ 劉慶艷.化學發(fā)光在疾病檢測中的應用［J］.國際醫(yī)藥衛(wèi)生導報，2003年第8期
           
          化學發(fā)光范文第3篇
           
           【關鍵詞】 胰島素（IRI）；光量子數(shù)；前胰島素原；胰島素原；化學發(fā)光免疫法
           
           【Abstract】 Objective To explore a reliable method for the determination of insulin.Methods Gather fasting agglutinating blood， centrifugalize them respectively to get the serum，which were directly set on instrument to determine.Results Linear rang: 0～335.0mIU/L，senitivity: the mean quantum of 0mIU/L IRI，10.1mIU/L IRI， 152.0mIU/L IRI and 335.0 mIU/L IRI were 3808，30350，357399 and 684567.Specificity:when the control serum was determined，the measure vlalue was within the standard deviation （SD），95%-105%.Precision:N=60 CV≤5%.Conclusion Chemiluminescence is a reliable，stable measurement method for determination of insulin with high sensitivity，precision and specificity.
           
           【Key words】 insulin;quantum;preproinsulin;proinsulin;chemiluminescence
           
           胰島素（IRI）是一種蛋白質激素，這是由胰島中的β細胞所合成、儲存和分泌的。IRI的功能是調節(jié)血液中葡萄糖的濃度水平。IRI初期是在β細胞中，以一種大分子量（分子量為1200）前胰島素原的形式存在。前胰島素原是一條由110氨基酸組成的單鏈前體。前胰島素原被切除掉24個氨基酸序列后形成胰島素原（分子量為9000），胰島素原是胰島素和C-肽的前體［1］。IRI是由兩條氨基酸鏈組成的。最初，IRI A鏈是由21個氨基酸組成，B鏈是由30個氨基酸組成；而C-肽是由31個氨基酸組成。IRI是隨餐后血液中葡萄糖的濃度高低而產生應答的。
           
           IRI水平雖然不是糖尿病患者常規(guī)診斷方法，但是IRI水平的檢測對于空腹低血糖患者、普通人群中的胰島素耐受患者、β細胞分泌功能異常患者的意義非常大［2，3］。
           
           1 材料與方法
           
           1.1 原理
           
           IRI的測定是一種直接化學發(fā)光技術和雙抗體兩點夾心免疫分析法相結合的測定方法。第一種抗體稱為標識抗體，是由單克隆抗胰島素抗體標記吖啶酯形成的；第二種抗體稱為固相化抗體，是由單克隆抗胰島素抗體以共價鍵的方式與順磁性顆粒相結合形成的。血清中的胰島素與相應抗體發(fā)生免疫反應后產生光量子，其光量子數(shù)的多少與血清中胰島素的濃度成正比，經標準曲線計算即可求得血清IRI的濃度水平。
           
           1.2 儀器與試劑 儀器：BAER ACS-180型全自動化學發(fā)光免疫分析儀。試劑（雙試劑）及標準液由廣州寶迪有限公司提供。
           
           1.3 方法 取血清于樣品杯中，置全自動化學發(fā)光免疫分析儀上，調整好檢測參數(shù)：血清25μl+第一試劑50μl于37℃孵育5min，加第二試劑250μl于37℃孵育2.5min，用蒸餾水對反應杯進行分離、抽吸、清洗，最后分別加300μl酸試劑和堿試劑到反應系統(tǒng)中進行反應發(fā)光，讀取光量子數(shù)，再根據標準曲線，計算出結果。
           
           1.4 標準曲線制備 采用兩點定標法，將標準血清0.0mIU/L和138.0mIU/L安放于儀器的定標位置上，編入測定程序，上機測定自動打印出標準曲線。
           
           2 結果
           
           2.1 精密度 取混合血清分成兩份，一份當天測定60次，結果IRI的值為22±0.8mIU/L，其對應的CV值為1.8%；另一份做批間試驗，測定10次，測定統(tǒng)計值為21±1.2mIU/L，其對應的CV值為2.8%。
           
           2.2 靈敏度 0mIU/L的IRI，其平均光量子數(shù)為3808，10.1mIU/L的IRI，其平均光量子數(shù)為30350，152.0mIU/L的IRI，其平均光量子數(shù)為357399，335.0mIU/L的IRI，其平均光量子數(shù)為684567。IRI測定的范圍為0～335.0mIU/L。
           
           2.3 回收試驗 在IRI為25mIU/L的血清中分別加入濃度為1mg/L的胰島素原、濃度為500μg/L的C-肽、濃度為1mg/L的胃泌素、濃度為1mg/L的胰高血糖素、濃度為1mg/L的胰泌素進行回收試驗，分別測得其回收率為:100.8%，95.1%，96.6%，100.2%，101.6%。
           
           2.4 線性分析 對一份定值血清稀釋不同濃度，觀察測定體系光量子數(shù)的變化量，即為IRI與光量子數(shù)的關系。結果顯示：IRI在本法的測定范圍是0～335.0mIU/L。當IRI大于335.0mIU/L時，開始偏離線性。因此對濃度高的標本必須先進行適當?shù)南♂專缓鬁y定。
           
           2.5 干擾試驗 當溶血（Hb>5g/L）、黃疸（膽紅素>0.2g/L）時，對結果干擾甚微。
           
           2.6 正常參考值 取100份經我院體檢合格者的血清，其中男50份，女50份，年齡19～55歲，平均37歲。檢測結果IRI：20.5±17.5mIU/L。男女之間差異無顯著性（P>0.05）。
           
           3 討論
           
           目前定量測定IRI的方法不多，過去一般用放射免疫法，該法測定步驟繁瑣，為半自動化操作，測定時間長達3天，測定范圍窄，且使用試劑具有放射性，對操作人員造成身體傷害及對周圍環(huán)境形成污染。現(xiàn)在基本已被化學發(fā)光免疫法所代替，該法測定步驟簡單，為全自動化操作，測定時間短，全過程最短為半小時即可完成，而它使用的試劑安全無放射性，為一般化學試劑，對操作人員無傷害，對周圍環(huán)境污染甚微。不過它也有缺點：其試劑為抗體試劑，有效期短，容易失效，定標周期短，一般為2周。在試劑的有效期內和定標周期內，對血清標本進行測定，其結果非常準確可靠。綜上所述，化學發(fā)光免疫法測定胰島素（IRI）是目前首選的方法。
           
           參考文獻
           
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           2 Chevenne D，Trivin F，Porquet D.Insulin assays and reference values.Diabetes Metab，1999，25（6）：459-476.
           
          化學發(fā)光范文第4篇
           
           2月來筆者所在醫(yī)院接受體檢的60例乙型肝炎病毒感染患者的血液標本，分離血清后保存待測，分別采用光激化學發(fā)光法（LICA）和化學發(fā)光微粒子免疫分析法（CMIA）檢測60例乙型肝炎病毒感染患者的五項血清學標志。結果：兩種檢測方法檢測乙型肝炎病毒感染患者血清學標志HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe的陽性率比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。但化學發(fā)光微粒子免疫分析法檢測抗HBc的陽性率明顯高于光激化學發(fā)光法，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P
           
           【關鍵詞】 光激化學發(fā)光法； 化學發(fā)光微粒子免疫分析法； 乙型肝炎病毒； 血清學標志； 性能
           
           中圖分類號 R512.6 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2016）3-0060-02
           
           doi：10.14033/ki.cfmr.2016.3.032
           
           乙型肝炎病毒屬于嗜肝DNA病毒科，是一種DAN病毒，易感染群體為人類和大猩猩，是引發(fā)乙型病毒性肝炎的主要病毒[1]。相關臨床數(shù)據調查顯示我國乙型肝炎感染率為60%～70%，約有7%的人口攜帶乙肝表面抗原，照此計算，我國約有9300萬人攜帶乙型肝炎病毒[2]。早期我國臨床多采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志，檢測準確性較低。隨著醫(yī)學技術的不斷進步，近年來化學發(fā)光技術被廣泛應用于乙型肝炎病毒感染血清學標志檢測中，筆者所在醫(yī)院本次針對光激化學發(fā)光法在乙型肝炎病毒感染血清學標志檢測中的應用性能進行了研究和評價，現(xiàn)做出以下整理報道。
           
           1 資料與方法
           
           1.1 一般資料
           
           納入2014年9月-2015年2月來筆者所在醫(yī)院接受體檢的60例乙型肝炎病毒感染患者參與本次研究，60例患者中，男32例，女28例，年齡19～71歲，平均（42.4±1.5）歲。60例患者均在參與研究前詳細知曉筆者所在醫(yī)院本次研究內容，為自愿性參與本次研究，且在參與研究前均已簽署臨床研究知情同意書。
           
           1.2 研究方法
           
           1.2.1 血液樣本 于清晨采集60例患者的空腹靜脈血，使用離心機以3000 r/min的速度分離血清，并保存在零下4 ℃的冰箱中待測。乙型肝炎病毒五項血清學標志包括HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、抗HBs（乙型肝炎表面抗體）、HBeAg（乙型肝炎e抗原）、抗HBe（乙型肝炎e抗體）和抗HBc（乙肝核心抗體）。
           
           1.2.2 儀器及試劑 光激化學發(fā)光法所使用的檢測儀器為博陽生物科技（上海）有限公司生產的高通量免疫分析儀、儀器配套試劑和全自動移液器。化學發(fā)光微粒子免疫分析法所使用的檢測儀器為美國雅培制藥有限公司診斷產品部生產的i2000SR免疫發(fā)光檢測儀和儀器配套試劑。分別使用上述兩種儀器檢測
           
           60例乙型肝炎病毒感染患者的五項血清學標志。
           
           1.3 陽性判定標準
           
           1.3.1 光激化學方光 抗HBc：>5.3 PEIU/ml；HBsAg：>0.2 IU/ml；抗HBs：>10 mIU/ml；HBeAg：>1 PEIU/ml；抗HBe：>2 PEIU/ml。
           
           1.3.2 化學發(fā)光微粒子免疫分析法 抗HBc：>1 S/CO；HBsAg：抗>0.5 IU/ml；抗HBs：>10 mIU/ml；HBeAg：>1 S/CO；抗HBe：
           
           1.4 統(tǒng)計學處理
           
           采用SPSS 22.0軟件對所得數(shù)據進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，P
           
           2 結果
           
           檢測發(fā)現(xiàn)光激化學發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒感染患者血清學標志HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe的陽性率分別為91.7%、88.3%、93.3%和86.7%，與采用化學發(fā)光微粒子免疫分析法檢測的93.0%、85.0%、90.0%和91.7%比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），但檢測抗HBc的陽性率為63.3%，明顯低于化學發(fā)光微粒子免疫分析法的85.0%，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P
           
           3 討論
           
           酶聯(lián)免疫吸附法為我國臨床檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志的常用方法，該種檢測方法所具有的臨床優(yōu)勢主要表現(xiàn)為可以最大程度的避免對環(huán)境和患者機體的危害、操作簡單、試劑有效期長，但因其靈敏度重復性較化學發(fā)光法差，酶純度和反應過程易受到環(huán)境的影響，假陽性檢出率和漏檢率較高，現(xiàn)階段逐漸被化學發(fā)光法所取代[3]。目前臨床上比較常用的化學發(fā)光法主要為光激化學發(fā)光法[4]。光激化學發(fā)光法的檢測原理為單線態(tài)氧分子能量傳遞發(fā)光免疫分析技術，并在此技術上應用了納米級顆粒，不僅可以有效增加生物分子的包被面積，同時納米級顆粒可在液相中保持穩(wěn)定的懸浮狀態(tài)，能夠借助結合發(fā)光原理進行免清洗和均相檢測。此外，該種檢測技術還應用了鏈霉親和素-生物素放大系統(tǒng)，該系統(tǒng)的作用是促使單位體積中的生物分子濃度提高，以實現(xiàn)提高檢測物質敏感性，減少試劑用量的目標[5]。
           
           總結光激化學發(fā)光法的應用優(yōu)勢主要包括以下幾點，（1）均相反應：酶聯(lián)免疫吸附法和化學發(fā)光微粒子免疫分析法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志均為非均相反應，該種反應方法存在的缺點為反應時間長、反應體系溫度欠均勻和反應不充分。而光激化學發(fā)光法檢測過程中的反應過程均為均相反應，與非均相反應相反具有反應時間短、反應體系溫度均勻、反應充分等優(yōu)勢，可有效提高檢測結果的準確性[6]。（2）可免清洗：由于光激化學發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志的均相反應過程中應用了結合發(fā)光原理，因此無需進行清洗分離，即可有效避免均相反應過程中的交叉污染和隨機誤差。（3）使用試劑量少：實踐應用發(fā)現(xiàn)，光激化學發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志時，每個檢測指標僅需使用25 μl試劑，在一定程度上提高了小樣本檢測小型化、芯片化和高通量的可能性[7]。（4）敏感性：光激化學發(fā)光法應用了納米級顆粒，不僅增加了均相反應的表面積，同時還有效提高了檢測過程的敏感性，縮短了檢測時間[8]。
           
           分析光激化學發(fā)光法在檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志抗HBc時存在應用局限性的原因主要為以下幾點：（1）光激化學發(fā)光法與化學發(fā)光微粒子免疫分析法選擇HBc原材料和溯源選擇存在一定程度的差異；（2）光激化學發(fā)光法與化學發(fā)光微粒子免疫分析法的檢測原理不同，光激化學發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志抗HBc的原理為競爭法，化學發(fā)光微粒子免疫分析法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志抗HBc的原理為夾心法，當兩種檢測方法的檢測結果出現(xiàn)差異時，檢驗者可采用第三種檢測方法進行驗證。筆者所在醫(yī)院本次研究因檢測樣本數(shù)量有限，未能進行第三方驗證。（3）本次研究發(fā)現(xiàn)，光激化學發(fā)光法乙型肝炎病毒感染血清學標志抗HBc的檢出能力不足，還有待進一步提高，但在檢測其他乙型肝炎病毒感染血清學標志時符合率很高。
           
           筆者所在醫(yī)院本次對光激化學發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志的性能進行研究發(fā)現(xiàn)采用光激化學發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe的陽性率與化學發(fā)光微粒子免疫分析法比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），但檢測抗HBc的陽性率卻明顯低于化學發(fā)光微粒子免疫分析法（P
           
           參考文獻
           
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          化學發(fā)光范文第5篇
           
           關鍵詞：人類絨毛膜促性腺激素；全自動化學發(fā)光儀；異位妊娠；葡萄胎
           
           人類絨毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌一種具有促進腺發(fā)育的一種糖蛋白，臨床上常用于診斷妊娠、異位妊娠、葡萄胎等疾病的診斷和治療。全自動化學發(fā)光儀是由西門子采用ADVIA Centaur Cp系統(tǒng)直接檢測化學發(fā)光強度。ADVIA Centaur cp檢測在標記試劑中采用吖啶酯作為標記物采用順磁微粒作為固相。系統(tǒng)采用多種檢測反應類型來檢測抗原或抗體。筆者采用該方法檢測妊娠期及患者血清HCG的變化程度進行分析，現(xiàn)報告如下。
           
           1 資料與方法
           
           1.1  一般資料：選取78例與妊娠相關的疾病患者，年齡25～35歲，停經均在35 d～10周；妊娠期30例，異位妊娠30例，葡萄胎18例，均作B超、手術及病理檢查已確診。
           
           1.2  儀器與試劑：西門子全自動化學發(fā)光分析儀及配套的血清HCG試劑，均由西門子公司出產。
           
           1.3  檢測方法：抽取受檢者靜脈血2 ml，分離血清。嚴格按照全自動化學發(fā)光儀的操作步驟進行操作。
           
           1.4  結果判別：非妊娠婦女血清HCG參考值為0～10 mIU/ml，妊娠婦女血清HCG參考值為＞10 mIU/ml葡萄胎、異位妊娠患者血清HCG參考＞1 000 mIU/ml。
           
           2  結果
           
           各組血清HCG檢測結果：見表1。全自動化學發(fā)光儀在妊娠初期就能快速、準確提早的檢測到妊娠期、異位妊娠、葡萄胎血清中血HCG的含量，有效的給臨床提出了診斷方案。
           
           表1  各組血清HCG檢測結果（mIU/ml）
           
           名稱
           
           35 d檢測血HCG均值
           
           8～10周檢測血HCG均值
           
           10周以后檢測血HCG均值
           
           妊娠期
           
           400
           
           2 345
           
           1 022
           
           異位妊娠
           
           1 345
           
           4 890
           
           2 345
           
           葡萄胎
           
           3 845
           
           1 235
           
           68 266.5
           
           3 討論
           
           在妊娠期，血清HCG是呈倍數(shù)增長的。在正常情況，妊娠35～40 d血清HCG的數(shù)值僅高于參考值的2倍左右，8～10周可以出現(xiàn)最高峰值，1～2周后可以下降，利用全自動化學發(fā)光儀測定妊娠期的血HCG在35 d就可以測到。在我院就診的妊娠期30位孕婦中，有兩位35 d未來月經，測的尿中HCG呈陰性反應，但用全自動化學發(fā)光測的血清HCG數(shù)值就＞20 mIU/ml。在醫(yī)生建議指導下，1周后來實驗室檢查血清HCG，這時測的血清HCG就開始上升到幾千，隨后2 d復查一次血清HCG就成倍增長[1-3]。
           
           在異位妊娠期，用全自動化學發(fā)光儀測定血HCG，35～40 d就可以測得血HCG數(shù)值在兩千以上，經過治療或手術后，明顯可看到血清HCG下降到幾百，在經過1周的治療血清HCG可以降到幾十。在我院就診的30位異位妊娠患者中，有1例患者陰道流血半個月，B超提示異位妊娠，但尿HCG呈陰性，全自動化學發(fā)光儀測的血HCG數(shù)值為941 mIU/ml，隔2 d復查血清HCG為1 200 mIU/ml，提示緩慢增長，醫(yī)生診斷為異位妊娠。
           
           用全自動化學發(fā)光儀檢測葡萄胎患者血清HCG，測的血清HCG數(shù)值可高達682 665.6的高數(shù)值。在檢測葡萄胎患者血清HCG時，先用HCG金標條測一下血清中的HCG如果測定線比質控線深的多，就要手工倍比稀釋，方法：加患者血清100 μl再加全自動化學發(fā)光儀專用血清HCG稀釋液200 μl，上機再點擊1:200倍稀釋這樣出來的結果乘以3，就能測到葡萄胎患者血清HCG的最高值。葡萄胎患者在醫(yī)生給與清宮治療后，測的血清HCG是下降的數(shù)值為2 000 mIU/ml。在1個月的治療過程中，血清HCG可降至100 mIU/ml以下。在我院就診的18例葡萄胎患者中，其中有1例葡萄胎患者復發(fā)了，剛到我院就診時，2個月未來月經，B超提示葡萄胎，用全自動化學發(fā)光儀測得血清HCG數(shù)值為634 502 mIU/ml，隨后經過復查治療可以使血清HCG降到120 mIU/ml。但在3個月回訪檢查中，再次妊娠葡萄胎停經45 d測的血清HCG數(shù)值為6 482 mIU/ml，根據B超提示、病理檢查，醫(yī)生診斷為復發(fā)的葡萄胎患者，給與治療1周后測的血HCG數(shù)值為125 mIU/ml。
           
           全自動化學發(fā)光儀檢測血清HCG具有提早、快速、準確、可靠、靈敏的特點。因此全自動化學發(fā)光儀檢測血清HCG得到臨床醫(yī)生的認可與應用。我希望在今后的工作中能進一步研究全自動化學發(fā)光對各個學科的應用，為臨床提供準確、無誤、快速的試驗結果。
           
           4 參考文獻
           
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