七夕表白創(chuàng)意
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七夕表白創(chuàng)意范文第1篇
【關(guān)鍵詞】 腎腫瘤 Np63 原癌基因蛋白質(zhì)cmdm2 免疫組織化學(xué)
［ABSTRACT］ Objective To explore the expressions of Np63 and MDM2 proteins in renal cell carcinoma (RCC) and their relationship with the tumor invasion and metastasis. Methods Using immunohistochemical method， Np63 and MDM2 in 76 RCC， and 14 normal renal tissues were detected. Results The expressions of Np63 and MDM2 in RCC and in normal renal tissue showed significantly different between them (F=28.34，22.57;q=6.471-12.529;P0.05)， but related to clinical staging (F=24.59，10.82;q=4.694-11.971；P
［KEY WORDS］ Kidney neoplasms; Np63; Protooncogene proteins cmdm2; Immunohistochemistry
腎細(xì)胞癌是人類泌尿系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤，且發(fā)病率呈增高趨勢(shì)。分子生物學(xué)研究表明，其能預(yù)測(cè)腫瘤的生物學(xué)行為，為腫瘤的診斷和治療及術(shù)后檢測(cè)提供新的依據(jù)。本研究旨在通過(guò)免疫組織化學(xué)方法觀察Np63和MDM2蛋白在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)情況及其意義，探討二者在腎細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮的作用，從而為臨床早期判斷腎癌的生物學(xué)行為和尋求新的治療途徑提供參考資料。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1 材料
實(shí)驗(yàn)組76例標(biāo)本均為我院2000～2006年間手術(shù)切除的腎細(xì)胞癌標(biāo)本。其中男46例，女30例；年齡34～85歲，平均56.2歲。病理學(xué)分型為：透明細(xì)胞癌48例，嗜色細(xì)胞癌10例，嫌色細(xì)胞癌5例，未分類型及其他13例。ROBSON分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期29例，Ⅲ期14例，Ⅳ期17例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移45例。對(duì)照組14例腎組織均取自離腫瘤2 cm以上的正常腎組織。
1.2 方法
1.2.1 主要試劑及來(lái)源
小鼠抗人MDM單克隆抗體（Dako 公司），Np63鼠抗人單克隆抗體濃縮液(Santa Cruz公司)，SP免疫組化試劑盒（通用型），DAB顯色試劑盒，EDTA抗原修復(fù)緩沖液和檸檬酸抗原修復(fù)緩沖液（福建邁新公司）。
1.2.2 免疫組織化學(xué)染色
石蠟切片二甲苯脫蠟，梯度乙醇水化，0.01 mmol/L PBS沖洗5 min，共3次。根據(jù)每一種抗體的要求，對(duì)組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)（其中P63為檸檬酸，pH 6.0修復(fù)，MDM2為EDTA，pH 8.0修復(fù)）。每張切片滴加體積分?jǐn)?shù)為0.03的H2O2雙蒸水溶液，室溫下放置10 min，用PBS振洗5 min，共3次。滴加正常非免疫動(dòng)物血清，室溫放置10min，甩去多余液體不洗。滴加適當(dāng)稀釋的一抗（P63為1∶100，MDM2為1∶75），于濕盒內(nèi)室溫下放置1 h，PBS振洗5 min，共3次。滴加生物素化二抗，置濕盒內(nèi)室溫放置15 min，PBS振洗5 min，共3次。滴加鏈霉素抗生物素蛋白過(guò)氧化物酶溶液，置濕盒內(nèi)室溫放置15 min，PBS振洗5 min，共3次。DAB顯色，鏡下觀察，自來(lái)水沖洗中止顯色。復(fù)染核，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封片。陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照分別采用已知的陽(yáng)性切片和PBS代替一抗，步驟與前相同。
1.2.3 結(jié)果判定
利用德國(guó)Simple PCI 圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行灰度測(cè)量，將免疫組化染色結(jié)果轉(zhuǎn)化為灰度值進(jìn)行定量分析。每張切片以組織間質(zhì)空白處入射光的值為定標(biāo)，在200倍鏡下每張切片選取5個(gè)視野，分別測(cè)定間質(zhì)灰度和腎癌灰度，取其平均值，作為Np63和MDM2蛋白表達(dá)測(cè)定值，測(cè)定值＝間質(zhì)灰度值-癌組織灰度值。
1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。組間比較采用單因素方差分析，組間多重比較采用SNK法，蛋白表達(dá)之間的相關(guān)分析采用Spearman法。
2 結(jié) 果
2.1 Np63、MDM2蛋白的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)組中Np63蛋白主要表達(dá)于腎癌細(xì)胞細(xì)胞核，呈棕黃色顆粒，MDM2主要表達(dá)于腎癌細(xì)胞細(xì)胞核；對(duì)照組中Np63和MDM2蛋白少量表達(dá)于近曲、遠(yuǎn)曲腎小管上皮細(xì)胞細(xì)胞核。
14例正常腎組織中Np63蛋白表達(dá)測(cè)定值為17.67±6.86，MDM2蛋白表達(dá)的測(cè)定值為14.15±5.24。腎癌組織與正常腎組織中Np63、MDM2蛋白的表達(dá)差異有顯著意義（F=28.34、22.57，q=6.471～12.529，P0.05）；不同臨床分期腎癌組織中Np63、MDM2蛋白的表達(dá)差異有顯著性（F=24.59、10.82，q=4.694～11.971，P
轉(zhuǎn)貼于
2.2 Np63、MDM2之間的關(guān)系
Np63和MDM2蛋白的表達(dá)存在著顯著相關(guān)性（rs=0.513，P
3 討 論
Np63（缺乏酸性N端反式激活區(qū)的截短型p63）是p63基因的一類亞型，對(duì)p63的研究表明，p63的結(jié)構(gòu)是p53家族中最為復(fù)雜的，p63基因在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中的作用因其結(jié)構(gòu)不同而不同。它能夠參與DNA 結(jié)合位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)或直接與p53 或TA p53（酸性N端反式激活區(qū)的全長(zhǎng)型p63）結(jié)合而滅活p53 或TA p53的功能，從而阻止p53 基因和TA 亞型所誘導(dǎo)的細(xì)胞周期抑制和發(fā)生凋亡[1]。PATTURAJAN等[2]研究表明，Np63的過(guò)表達(dá)介導(dǎo)了β鏈蛋白的磷酸化水平降低，后者又反過(guò)來(lái)誘導(dǎo)鏈蛋白核積聚和活化了β鏈蛋白信號(hào)傳導(dǎo)途徑。正因?yàn)镹p63異構(gòu)體是β鏈蛋白信號(hào)途徑的正向調(diào)節(jié)因子，才使得NP63異構(gòu)體具有致癌的特性。本文結(jié)果顯示，腎細(xì)胞癌Np63的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，推測(cè)Np63表現(xiàn)出來(lái)的是癌基因的功能，可能具有啟動(dòng)特定突變體腫瘤發(fā)生的生物特性，并為癌細(xì)胞的存活提供有利條件。Np63的表達(dá)隨ROBSON分期增高而增加，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Np63的表達(dá)要高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。提示Np63在腎細(xì)胞癌的形成、進(jìn)展及轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮一定的調(diào)控作用。本文結(jié)果還顯示，在不同病理類型的腎癌組織中Np63的表達(dá)差異無(wú)顯著性，考慮其在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中所起的作用可能是一樣的。
已有研究結(jié)果表明，MDM2與一些腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[3]。MDM2基因最初是由CAHILLYSNYDER等[4]在自發(fā)腫瘤鼠Balb/c3T3成纖維細(xì)胞系中鑒定出來(lái)的。MDM2體內(nèi)最重要的作用是抑制野生型p53（wtp53）基因的激活轉(zhuǎn)錄功能和抗腫瘤活性。其主要通過(guò)與p53形成復(fù)合物或加速p53的分解，而高水平的MDM2基因產(chǎn)物本身也可以使p53的功能失活，抑制p53的功能，對(duì)p53起負(fù)調(diào)節(jié)的作用[5，6]。本文結(jié)果顯示，腎細(xì)胞癌MDM2的表達(dá)要明顯高于正常對(duì)照組，推測(cè)MDM2表達(dá)過(guò)強(qiáng)可封閉p53介導(dǎo)的反式激活作用，使p53功能喪失，導(dǎo)致基因的不穩(wěn)定及細(xì)胞增生，從而表現(xiàn)出癌基因蛋白的作用，參與腫瘤形成。MDM2的表達(dá)隨ROBSON臨床分期增高而增加，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者M(jìn)DM2表達(dá)要高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，提示MDM2參與腎細(xì)胞癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。
總之，Np63和MDM2都與p53存在密切的聯(lián)系。而兩者在對(duì)p53的作用上機(jī)制不同，但作用結(jié)果是一致的，兩者在腎細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展中應(yīng)該是起協(xié)同作用的。
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七夕表白創(chuàng)意范文第2篇
[關(guān)鍵詞] 胎膜早破；白細(xì)胞介素-6；細(xì)胞黏附因子-1；絨毛膜羊膜炎
[中圖分類號(hào)] R714.21 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2013）02（a）-0057-03
胎膜早破（premature rupture of membranes，PROM）的發(fā)生率占分娩總數(shù)的10.0%～12.4%[1]，近年來(lái)發(fā)病率有上升趨勢(shì)，易引起早產(chǎn)、臍帶脫垂、難產(chǎn)及母嬰感染等并發(fā)癥，如處理不當(dāng)可危及母嬰安全，而將近80%的PROM發(fā)生于足月妊娠[2]。羊膜腔感染的早期，絕大多數(shù)孕婦無(wú)臨床癥狀，而越來(lái)越多的資料證實(shí)羊膜腔感染與PROM密切相關(guān)[3]，因此如何在產(chǎn)前早期快速檢測(cè)出亞臨床感染的PROM孕婦，并給予及時(shí)治療，已成為降低圍生期孕婦發(fā)病率和死亡率的關(guān)鍵。本研究旨在探討孕婦血清白細(xì)胞介素-6（IL-6）、細(xì)胞黏附因子-1（IACM-1）水平對(duì)PROM臨床感染的監(jiān)測(cè)價(jià)值，從而為臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2010年1月～2012年6月在我院產(chǎn)科住院妊娠滿28～37周分娩的PROM孕婦80例為觀察組，平均年齡（28.98±3.36）歲。根據(jù)胎膜破裂的時(shí)間，再分為足月PROM組（發(fā)生在孕37周前）與未足月PROM組（發(fā)生在孕37周及37周后），其中足月PROM組49例，平均年齡（28.98±3.20）歲，未足月PROM組31例，平均年齡（28.97±3.65）歲。選取同期住院未臨產(chǎn)、因骨盆狹窄和（或）社會(huì)因素而行選擇性剖宮產(chǎn)的正常孕婦40例為對(duì)照組，平均年齡（28.68±3.43）歲，兩組均為單胎初產(chǎn)。兩組一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 孕婦血清標(biāo)本的采集 所有孕婦取血時(shí)均無(wú)宮縮，取肘靜脈血5 mL分離血清，-40℃冰箱中保存待測(cè)。
1.2.2 胎膜標(biāo)本的采集 胎盤(pán)娩出后取離胎膜破口5 cm以上的胎膜組織2 cm×3 cm×0.5 cm，10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，室溫保存待病理學(xué)檢測(cè)。
1.2.3 檢測(cè)方法 IL-6、IACM-1試劑盒由北京邦定公司提供，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)。按試劑盒的說(shuō)明書(shū)配制試劑和緩沖液，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定并換算出樣本中出IL-6、IACM-1水平的含量。
1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)
1.3.1 PROM診斷標(biāo)準(zhǔn) ①孕婦自覺(jué)有大量液體自陰道流出，陰道窺器見(jiàn)液體自宮頸流出或后穹隆較多積液中見(jiàn)胎脂樣物質(zhì)；②陰道液pH > 7；③陰道液涂片烘干后鏡檢可見(jiàn)羊齒植物狀結(jié)晶；④羊膜鏡直視胎兒先露部分，看不到前羊膜囊[4]。
1.3.2 胎盤(pán)絨毛膜羊膜炎病理診斷標(biāo)準(zhǔn) 絨毛膜及羊膜組織中中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)每高倍視野5～10個(gè)為輕度；11～30個(gè)為中度；>30個(gè)為重度[5]。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 18.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 觀察組各亞組與對(duì)照組血清IL- 6、IACM-1比較
本研究結(jié)果提示，觀察組孕婦血清IL-6、IACM-1濃度高于對(duì)照組，未足月PROM組血清IL-6、IACM-1濃度高于足月PROM組，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.01）。見(jiàn)表1。
2.2 觀察組內(nèi)不同絨毛膜羊膜炎組IL-6、IACM-1比較
將觀察組按絨毛膜羊膜炎病理程度分為PROM未感染組、PROM輕度感染組和PROM中度感染組，比較各組母血IL-6、IACM-1水平。其中，PROM中度感染組母血IL-6、IACM-1水平高于PROM未感染組及PROM輕度感染組，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.01）；觀察組內(nèi)PROM未感染組與觀察組內(nèi)PROM胎膜絨毛膜羊膜炎輕度感染組母血IL-6、IACM-1水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表2。
3 討論
PROM是妊娠中晚期常見(jiàn)的產(chǎn)科并發(fā)癥，其中母體生殖道感染及其引起的宮內(nèi)感染是其發(fā)生的主要原因。有研究指出一旦胎膜破裂超過(guò)24 h，胎兒可能受到陰道菌群的上行感染導(dǎo)致羊膜、臍帶以及胎盤(pán)炎癥，胎兒可能吸入被感染的羊水發(fā)生全身感染導(dǎo)致死胎、早產(chǎn)或新生兒敗血癥[6]。PROM與感染關(guān)系密切且與新生兒的發(fā)病率與死亡率有關(guān)，我國(guó)新生兒敗血癥的死亡率高達(dá)12.0%～20.5%，所以密切監(jiān)測(cè)及預(yù)防PROM患者宮內(nèi)感染是降低新生兒感染率的一項(xiàng)重要措施。
目前用于監(jiān)測(cè)PROM是否存在感染常用的臨床指標(biāo)包括：母體體溫、心率、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、C反應(yīng)蛋白（CRP）、陰道分泌物味臭、膿性等指標(biāo)，這些指標(biāo)出現(xiàn)晚且多數(shù)孕婦呈現(xiàn)亞臨床表現(xiàn)癥狀不典型，給早期診斷帶來(lái)許多困難。絨毛膜羊膜炎的臨床征象常出現(xiàn)在宮內(nèi)感染的晚期且組織學(xué)上有絨毛膜羊膜炎的患者中僅有25%出現(xiàn)臨床征象[7]，所以尋找有效的預(yù)測(cè)感染監(jiān)測(cè)指標(biāo)是目前亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題，有研究認(rèn)為，CRP對(duì)預(yù)測(cè)PROM并發(fā)新生兒感染有一定的特異性和敏感性，對(duì)絨毛膜羊膜炎的預(yù)測(cè)價(jià)值高[8]，但也有研究指出新生兒感染與CRP、白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞值無(wú)明顯相關(guān)性[9]。
IL-6屬于由單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生的炎癥細(xì)胞因子，參與機(jī)體炎性反應(yīng)和創(chuàng)傷愈合。正常妊娠婦女由于宮內(nèi)蛻膜和絨毛組織富含單核細(xì)胞成為其羊水及血中IL-6的重要來(lái)源。病理情況下如羊膜腔感染發(fā)生時(shí)除蛻膜和絨毛以外大量的炎癥細(xì)胞將產(chǎn)生更多的IL-6[10]。本研究結(jié)果提示，觀察組孕婦血清IL-6濃度高于對(duì)照組，觀察組未足月PROM組孕婦血清IL-6濃度高于觀察組足月PROM組，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。將觀察組按絨毛膜羊膜炎病理程度分為PROM未感染組、PROM輕度感染組和PROM中度感染組，比較各組母血IL-6、IACM-1水平。其中，PROM中度感染組母血IL-6、水平高于PROM未感染組及PROM輕度感染組，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）；觀察組內(nèi)PROM未感染組與觀察組內(nèi)PROM胎膜絨毛膜羊膜炎輕度感染組母血IL-6水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），說(shuō)明IL-6升高是羊膜腔感染的標(biāo)志，IL-6的升高出現(xiàn)臨床癥狀之前并且隨破膜時(shí)間延長(zhǎng)病原體入侵機(jī)會(huì)增加感染加重其含量也會(huì)逐漸增加[11]。
IACM-1是細(xì)胞黏附分子家族的重要成員，跨膜表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞。ICAM-1調(diào)節(jié)細(xì)胞與細(xì)胞間以及細(xì)胞和基質(zhì)間的黏附作用，參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、免疫炎性反應(yīng)等一系列生理和病理過(guò)程[12]。Winkler等[13]研究發(fā)現(xiàn)早產(chǎn)孕婦子宮下段血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)明顯增加。炎性反應(yīng)改變組織、血管和胎盤(pán)絨毛血管屏障的通透性，與感染相關(guān)的ICAM-1很快進(jìn)入母體血流，其血清含量明顯增加[14]。本研究結(jié)果提示，觀察組孕婦血清IACM-1濃度高于對(duì)照組，觀察組未足月PROM亞組血清IACM-1濃度高于觀察組足月PROM亞組，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.01）。PROM中度感染組母血IACM-1水平高于PROM未感染組及PROM輕度感染組，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.01）；觀察組內(nèi)PROM未感染組與觀察組內(nèi)PROM胎膜絨毛膜羊膜炎輕度感染組母血IACM-1水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。ICAM-1的升高出現(xiàn)臨床癥狀之前，提示ICAM-1參與PROM和絨毛膜羊膜炎的發(fā)病機(jī)制。有研究證實(shí)宮內(nèi)感染時(shí)，羊水中IL-1、IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量均增加，羊水中ICAM-1水平與羊水培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果呈正相關(guān)[15]。快速、準(zhǔn)確診斷亞臨床狀態(tài)羊膜絨毛膜炎所致的PROM是產(chǎn)科界亟待解決的事情，IL-6、ICAM-1因子測(cè)定使其成為可能，臨床醫(yī)生可根據(jù)IL-6、ICAM-1水平指導(dǎo)抗生素治療，以避免盲目使用抗生素給母兒帶來(lái)的副作用。同時(shí)對(duì)孕齡較小的早產(chǎn)PROM合并羊膜腔感染孕婦還可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)IL-6、ICAM-1水平觀察治療效果，若經(jīng)有效抗感染治療后絨毛膜羊膜炎被控制，組織得以再生和修復(fù)，IL-6、ICAM-1的產(chǎn)生也相應(yīng)減少。
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七夕表白創(chuàng)意范文第3篇
關(guān)鍵詞：肝細(xì)胞癌；HMGB1 ；免疫組織化學(xué) ；計(jì)算機(jī)圖像分析
高遷移率族蛋白B1（high-mobility group box-B1，HMGB1）是高度保守的非組蛋白DNA結(jié)合蛋白，哺乳動(dòng)物中HMGB1具有99%的同源性質(zhì)，HMGB1作為一種核蛋白，在DNA結(jié)構(gòu)、基因轉(zhuǎn)錄、重組、細(xì)胞存活等方面發(fā)揮重要的調(diào)控作用[1，2]。最新研究發(fā)現(xiàn)HMGB1與原發(fā)性肝細(xì)胞癌有關(guān)，由于其在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的表達(dá)特異性升高而引起研究者[3-5]的注意。因此，我們采用免疫組織化學(xué)及計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)方法分析HMGB1蛋白在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及與其臨床病理因素的關(guān)系，為進(jìn)一步探討HMGB1與原發(fā)性肝細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展，浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，尋找新的生物學(xué)標(biāo)記物及治療靶點(diǎn)奠定基礎(chǔ)。
材料與方法
一、一般資料
材料：標(biāo)本來(lái)自2008年1月-2011年3月昆明市第一人民醫(yī)院肝膽外科的原發(fā)性肝癌患者，以距癌灶邊緣5cm為分界分別留取肝癌癌灶組織，非癌組織各30例。其中男24 例，女6 例，年齡36-75 歲，平均年齡59.6±10.5 歲。瘤體＜5 cm 16例，瘤體≥5 cm 14例，所有標(biāo)本均經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)為原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌。
二、方法
1.免疫組織化學(xué)法
兔抗人HMGB1多克隆抗體及S-P免疫組化試劑盒分別購(gòu)自美國(guó)PTG公司，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。肝癌及癌旁組織免疫組化以經(jīng)典的S-P法進(jìn)行（HMGB1工作濃度1：100，每片滴加HMGB1一抗，4℃冰箱過(guò)夜）DAB顯色，以PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照，以已證實(shí)HMGB1染色陽(yáng)性的肝癌標(biāo)本作陽(yáng)性對(duì)照。
2.計(jì)算機(jī)圖像分析 應(yīng)用HPIAS—1000 高清晰度病理圖文分析系統(tǒng)對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行定量分析。（詳細(xì)操作步驟參照HPIAS—1000型圖像分析儀使用手冊(cè)。）
3. 結(jié)果判斷：
（1）免疫組化 細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色或棕褐色染色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞。每張切片在高倍鏡下（X200）隨機(jī)觀察5個(gè)視野，計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞/視野，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜15%為表達(dá)陰性（-），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)15%-50%為表達(dá)弱陽(yáng)性（+），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)51%-75%為表達(dá)中等強(qiáng)度陽(yáng)性（++），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞75%為表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性（+++），其中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)大于50%為過(guò)表達(dá)。
（2）計(jì)算機(jī)圖像分析 每組標(biāo)本均在400×放大倍數(shù)下按照無(wú)偏采樣原則取5個(gè)視野，每個(gè)視野均按照無(wú)偏采樣原則取5個(gè)細(xì)胞進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)陽(yáng)性單位（PU）結(jié)果來(lái)判斷免疫組化染色強(qiáng)度的差異。PU值用均值+標(biāo)準(zhǔn)差（）表示。
4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理。多樣本和兩樣本半定量積分的陽(yáng)性表達(dá)比較均采用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn)，蛋白表達(dá)強(qiáng)度差異PU值（）進(jìn)行單因素方差分析后行LSD-t檢驗(yàn)。（檢驗(yàn)水準(zhǔn)ɑ=0.05，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。）
三 結(jié)果
1.免疫組化染色 癌旁組織中HMGB1蛋白表達(dá)較低，表現(xiàn)為少數(shù)胞核和（或）胞漿微弱著色。HMGB1蛋白在肝癌組織中呈過(guò)表達(dá)，陽(yáng)性顆粒主要位于細(xì)胞核中，細(xì)胞漿也有微弱著色（圖1～4）。肝細(xì)胞癌組織中HMGB1陽(yáng)性表達(dá)率為80%，與癌旁組織30%相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。肝細(xì)胞癌組織Ⅰ、Ⅱ-Ⅲ、Ⅳ級(jí)中HMGB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸增加，分別為62.5%、83%、90%，（均P＜0.05）。隨著肝細(xì)胞癌淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，HMGB1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率增加，分別為76.2%、89%，包膜不完整腫瘤的HMGB1陽(yáng)性率（81.8%）高于包膜完整者（78.9%），其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而HMGB1蛋白與肝細(xì)胞癌患者年齡、性別及腫瘤大小無(wú)關(guān)（均P＞0.05）。計(jì)算機(jī)圖像分析結(jié)果與免疫組化結(jié)果一致（詳見(jiàn)表1～2）。
中呈陽(yáng)性表達(dá) ×100
中呈陽(yáng)性表達(dá) ×400
2． 計(jì)算機(jī)圖像分析結(jié)果
表1 HMGB1與肝細(xì)胞癌及癌旁組織的關(guān)系
表2 HMGB1與原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌臨床病理因素的關(guān)系
組別
例數(shù)
陽(yáng)性單位（PU） （） P值
性別
男
25
13.67 ± 0.35
0.517
女
5
11.11 ± 1.08
年齡/歲
＜50
6
9.83 ± 0.96
0.180
≥50
24
14.30 ±0.10
腫瘤大小/cm
＜5
16
12.17 ± 0.43
0.432
≥5
14
14.47 ± 1.23
腫瘤包膜
完整
19
11.13 ± 0.59
0.041
不完整
11
16.89 ± 8.80
Edmondson分級(jí)
Ⅰ級(jí)（高分化）
8
6.57 ± 0.45
0.041
Ⅱ-Ⅲ級(jí)（中分化）
12
12.51 ± 0.18
0.001
Ⅳ級(jí)（低分化）
10
18.95 ± 1.12
0.034
淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移
無(wú)
21
10.99 ± 0.01
0.014
有
9
18.48 ± 1.23
四 討論
高遷移率蛋白B1（high-mobility group box-B1，HMGB1）基因于1973年首先由Sanders等[6，7] 在小牛胸腺中發(fā)現(xiàn)，人HMGB1定位于13q12帶，編碼含215個(gè)氨基酸的單鏈多肽，HMGB1由3個(gè)功能區(qū)組成：兩個(gè)含正電荷區(qū)域（A盒和B盒）和一個(gè)呈負(fù)電荷的羧基端。HMGB1作為一種重要的晚期炎性介質(zhì)，與膿毒癥、神經(jīng)軸突生長(zhǎng)、免疫性疾病、惡性腫瘤、缺血再灌注損傷等疾病相關(guān)。而HMGB1在腫瘤中的作用為現(xiàn)今研究的熱點(diǎn)，作為一種潛在的多功能“晚期”炎性介質(zhì)，HMGB1被壞死腫瘤細(xì)胞釋放道微環(huán)境中，而細(xì)胞外的HMGB1可導(dǎo)致慢性炎癥/修復(fù)性反應(yīng)，可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的存活、進(jìn)展及轉(zhuǎn)移[8]。
迄今為止，研究發(fā)現(xiàn)[9，10]多種腫瘤組織和患者血清中均有HMGB1的高表達(dá)（如結(jié)直腸癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、頭頸部鱗癌、膀胱癌、宮頸癌），且其配體RAGE在不同的腫瘤細(xì)胞中也有表達(dá)。給予HMGB1或RAGE抑制劑，可以明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖[13]。HMGB1并與腫瘤分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及預(yù)后明顯相關(guān)[3，9]。而HMGB1在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制目前有以下兩種說(shuō)法[12，13]：①HMGB1的過(guò)表達(dá)可致腫瘤表型基因的表達(dá)異常，而引起腫瘤；②HMGB1 的過(guò)表達(dá)可使獲得腫瘤表型的細(xì)胞免于凋亡，繼續(xù)生長(zhǎng)，導(dǎo)致腫瘤。原發(fā)部位腫瘤細(xì)胞分泌HMGB1到達(dá)區(qū)域淋巴結(jié)，通過(guò)減少巨噬細(xì)胞數(shù)量削弱淋巴組織的抗轉(zhuǎn)移潛能。HMGB1通過(guò)與其配體RAGE 結(jié)合， 激活了細(xì)胞內(nèi)JNK 、NF-κB p65、和p42/ p44 、Rac1/Cdc42等，進(jìn)而激活MAPK s， PI3K/Akt， Rho GTP酶，Jak/STAT， and Src family kinases（沉降紅細(xì)胞家族激酶）等[14-16]信號(hào)傳導(dǎo)通路，引起明膠酶A ( MM P-2) 和明膠酶B( MMP-9) 的激活，引起纖維蛋白溶酶等系統(tǒng)激活， 使細(xì)胞外基質(zhì)降解， 抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移。
迄今為止，關(guān)于HMGB1與肝癌相關(guān)研究的報(bào)道少見(jiàn)。Sakuraoka Y[4，17]等檢測(cè)結(jié)果顯示肝癌細(xì)胞株HepG2中有RAGE mRNA及其蛋白的表達(dá)，說(shuō)明HMGB1能刺激人肝癌細(xì)胞株HepG2的生長(zhǎng)、增殖。Cheng等[3，18]研究發(fā)現(xiàn)， 肝細(xì)胞癌患者HMGB1的血清水平比慢性肝炎及肝硬化患者明顯升高， 血清HMGB1的表達(dá)與肝癌的TNM分期、病理學(xué)分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，由此可見(jiàn)血清HMGB1與肝細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。而HMGB1在原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織中的發(fā)生、發(fā)展有著怎樣的作用，及HMGBI與肝細(xì)胞癌臨床病理特征的具體關(guān)系正是我們研究的目的。
本研究使用免疫組化及計(jì)算機(jī)圖像分析結(jié)果顯示，HMGB1蛋白在肝癌組織中呈過(guò)表達(dá)，其檢測(cè)結(jié)果與馮華國(guó)[16]的研究一致，提示HMGB1在原發(fā)性肝細(xì)胞癌的發(fā)病過(guò)程中起著關(guān)鍵性的作用。隨著肝細(xì)胞癌Edmondson病理學(xué)分級(jí)增加，HMGB1蛋白陽(yáng)性表達(dá)增加，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移肝癌患者比無(wú)轉(zhuǎn)移者HMGB1表達(dá)增加，腫瘤包膜不完整比包膜完整者HMGB1表達(dá)增加。筆者認(rèn)為HMGB1在不同病理階段其在機(jī)體含量不同，對(duì)腫瘤細(xì)胞的促增殖作用不同。而HMGB1蛋白表達(dá)與肝細(xì)胞癌患者年齡、性別及腫瘤大小無(wú)相關(guān)。
本研究首次揭示了HMGB1蛋白表達(dá)與人肝細(xì)胞癌組織Edmondson病理學(xué)分級(jí)、包膜完整、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。提示HMGB1在原發(fā)性肝細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮了重要作用。HMGB1可能是原發(fā)性肝細(xì)胞癌的一種新的潛在的腫瘤特異性標(biāo)志物。為肝細(xì)胞癌分子靶向治療提供了依據(jù)。
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七夕表白創(chuàng)意范文第4篇
20xx七夕節(jié)時(shí)間20xx七夕是20xx年8月28日，農(nóng)歷的七月初七。
七夕，原名為乞巧節(jié)。七夕乞巧，這個(gè)節(jié)日起源于漢代，東晉葛洪的《西京雜記》有“漢彩女常以七月七日穿七孔針于開(kāi)襟樓，人俱習(xí)之”的記載，這便是我們于古代文獻(xiàn)中所見(jiàn)到的最早的關(guān)于乞巧的記載。
后來(lái)的唐宋詩(shī)詞中，婦女乞巧也被屢屢提及，唐朝王建有詩(shī)說(shuō)“闌珊星斗綴珠光，七夕宮娥乞巧忙”。據(jù)《開(kāi)元天寶遺事》載：唐太宗與妃子每逢七夕在清宮夜宴，宮女們各自乞巧，這一習(xí)俗在民間也經(jīng)久不衰，代代延續(xù)。
有趣的七夕情人節(jié)創(chuàng)意禮物1、楓木情書(shū)，美洲天然楓木，高精度激光雕刻技術(shù)，精致仿紅木包裝盒，可以自由設(shè)計(jì)文字版面哦!是不是還記得第一次寫(xiě)情書(shū)的時(shí)候?是否還記得那個(gè)特別容易臉紅的青澀愛(ài)情時(shí)代?為你最愛(ài)的她，寫(xiě)下最唯美的情書(shū)吧!超適合表白哦。
2、定制刻字純銀飾品，可以是項(xiàng)鏈，手鏈或者戒指，純銀飾品采用國(guó)庫(kù)925純銀材質(zhì)，都是純手工精心打造。定制純銀刻字飾品采用德國(guó)細(xì)微拋光技術(shù)，令佩戴更舒適。
3、照片書(shū)畫(huà)冊(cè)，將以前堆放在電腦硬盤(pán)角落里的照片釋放出來(lái)，從相識(shí)，到相知、到相愛(ài)，排列成一本照片書(shū)畫(huà)冊(cè)，還可以加上自己想說(shuō)的話，不僅可以做為情人節(jié)禮物，更具有深刻的意義哦。
4、個(gè)性成對(duì)對(duì)照片抱枕，將你們的甜蜜照片印制在抱枕上，讓美好的回憶時(shí)刻伴隨，更能體現(xiàn)你的用心，還可以讓那美麗的、可愛(ài)的，精彩的瞬間做成照片抱枕裝扮你的小窩。
5、情侶恤衫，定制獨(dú)一無(wú)二的個(gè)性恤，在這個(gè)七夕情人節(jié)，將你們的甜蜜愛(ài)情宣言出來(lái)吧。非常適合約會(huì)、寫(xiě)真拍照、新婚蜜月、戶外出游哦。
6、個(gè)性對(duì)杯，可以定制的變色杯，把手是心形的，很有創(chuàng)意哦。最好是定制甜蜜照片的，當(dāng)?shù)谷霟崴螅愫湍阕類?ài)的她的照片慢慢浮現(xiàn)，會(huì)不會(huì)感到很幸福呢?而且杯子的寓意是：愛(ài)你一輩子!
7、陽(yáng)光罐，白天默默的將陽(yáng)關(guān)吸收進(jìn)杯子里面，夜晚靜靜的發(fā)光。無(wú)論多漆黑的夜晚也不會(huì)害怕。非常適合怕黑的女生喲!
8、法國(guó)主題絲巾，不論哪一種氣質(zhì)，都美好如斯，一如真絲的輕柔典雅。絲代表思念，送老婆女朋友，更能表達(dá)心意。
9、刻字梳子，化妝鏡，鏡里境外都是你，悲傷的你，喜悅的你，哭泣的你，生氣的你，每一個(gè)都是我的最愛(ài)。用刻有祝福的梳子，梳掉你的每一絲煩惱。
10、個(gè)性證書(shū)，獎(jiǎng)牌，在這個(gè)七夕情人節(jié)，把職高的榮譽(yù)送給你，為你頒發(fā)最佳女友證獎(jiǎng)牌，平凡的生活也需要小浪漫來(lái)維系的，一個(gè)小小感動(dòng)，都會(huì)促進(jìn)你們之間的感情哦!
七夕情人節(jié)習(xí)俗投針驗(yàn)巧
這是七夕穿針乞巧風(fēng)俗的變體，源于穿針，又不同于穿針，是明清兩代的盛行的七夕節(jié)俗。明劉侗、于奕正的《帝京景物略》說(shuō)：“七月七日之午丟巧針。婦女曝盎水日中，頃之，水膜生面，繡針投之則浮，看水底針影。有成云物花頭鳥(niǎo)獸影者，有成鞋及剪刀水茄影者，謂乞得巧;其影粗如錘、細(xì)如絲、直如軸蠟，此拙征矣。”《直隸志書(shū)》也說(shuō)，良鄉(xiāng)縣(今北京西南)“七月七日，婦女乞巧，投針于水，借日影以驗(yàn)工拙，至夜仍乞巧于織女”請(qǐng)于敏中《日下舊聞考》引《宛署雜記》說(shuō)：“燕都女子七月七日以碗水暴日下，各自投小針浮之水面，徐視水底日影。或散如花，動(dòng)如云，細(xì)如線，粗租如錐，因以卜女之巧。”
種生求子
舊時(shí)習(xí)俗，在七夕前幾天，先在小木板上敷一層土，播下粟米的種子，讓它生出綠油油的嫩苗，再擺一些小茅屋、花木在上面，做成田舍人家小村落的模樣，稱為“殼板”，或?qū)⒕G豆、小豆、小麥等浸于磁碗中，等它長(zhǎng)出敷寸的芽，再以紅、藍(lán)絲繩扎成一束，稱為“種生”，又叫“五生盆”或“生花盆”。南方各地也稱為“泡巧”，將長(zhǎng)出的豆芽稱為巧芽，甚至以巧芽取代針，拋在水面乞巧。還用蠟塑各種形象，如牛郎、織女故事中的人物，或禿鷹、鴛鴦、等動(dòng)物之形，放在水上浮游，稱之為“水上浮”。又有蠟制的嬰兒玩偶，讓婦女買回家浮于水土，以為宜子之祥，稱為“化生”。
七夕表白創(chuàng)意范文第5篇
七夕送喜歡的人的禮物NO.1竹簡(jiǎn)情書(shū)
竹簡(jiǎn)書(shū)寫(xiě)在我國(guó)有著非常悠久的歷史，可以說(shuō)是經(jīng)過(guò)了漫長(zhǎng)的時(shí)間考驗(yàn)流傳下來(lái)的，再這樣的載體上書(shū)寫(xiě)你們愛(ài)情的密語(yǔ)，你們的愛(ài)情也會(huì)像這竹簡(jiǎn)一樣，一直流傳下來(lái)。
NO.2鮮花
愛(ài)情里永遠(yuǎn)少不了玫瑰花的身影，一朵是一心一意，11朵是一生一世，99朵是長(zhǎng)長(zhǎng)久久，趕緊選擇你們想要表達(dá)的話語(yǔ)吧，玫瑰花是最好的使者。
No.3情侶對(duì)戒
知道為什么婚禮上總是要相互帶上婚戒嗎，因?yàn)榻渲赶笳髁藢?duì)彼此的承諾，想要對(duì)方感受到你愛(ài)他的決心和彼此的長(zhǎng)久，去選擇一對(duì)情侶對(duì)戒吧，對(duì)彼此做出最鄭重的承諾。
NO.4照片抱枕
去選擇一張你們最滿意的合影吧，上面記錄著你們相愛(ài)且美好的回憶，將這張照片為圖片，制作一個(gè)你們的照片抱枕，這樣每次抱著這個(gè)抱枕，就像是你們小心翼翼呵護(hù)著你們的愛(ài)情。
NO.5情侶卡通公仔
這是每個(gè)女生都會(huì)喜歡的，也是每個(gè)情侶都會(huì)珍藏的創(chuàng)意禮物，如果你還沒(méi)有送給她，那么什么都不要再說(shuō)，趕緊去準(zhǔn)備一個(gè)吧，把你們二人的合照定制下來(lái)，即可成為永恒的紀(jì)念。
NO.6情侶打火機(jī)
打火機(jī)現(xiàn)在也出情侶款了，可以把你們的照片彩印在上面，這樣當(dāng)TA點(diǎn)起火時(shí)，就能看見(jiàn)你們二人的溫馨，是不是很有愛(ài)喔。
七夕感人表白語(yǔ)1、用你的名字和我的姓氏成就這故事，從此以后無(wú)憂無(wú)愁，故事平淡但當(dāng)中有你已經(jīng)足夠!
2、我們的愛(ài)真的是沒(méi)有結(jié)局的嗎?我很怕……為什么你要對(duì)我這么好?我真的很想跟你結(jié)婚……可以嗎?
3、這世界上也許有很多人比你更適合我，但我知道只有你最愛(ài)我。不管怎樣，我要和你過(guò)完這輩子，下輩子，下下輩子。我要你要我!
4、神曾對(duì)我說(shuō)當(dāng)金魚(yú)閉上眼睛落下淚時(shí)我們將分離,為此我乞求一世,致死也不閉目落淚,以次來(lái)祝福我們一生一世的愛(ài)情。
5、什么叫浪漫，明知道她不愛(ài)你，還送她99朵玫瑰。什么叫浪費(fèi)，明知道她愛(ài)你還送她99朵玫瑰。
6、如果愛(ài)你是錯(cuò)，我不愿對(duì);如果對(duì)就是等于離開(kāi)你，我情愿錯(cuò)一輩子。我知道你很忙，但是你一定要知道：你今天的任務(wù)是很重要的，因?yàn)槟愕娜蝿?wù)是知道我在想念你。
7、我愛(ài)你，可是我不敢說(shuō)，我怕說(shuō)了我就會(huì)馬上死去，我不怕死，只是怕假如我真的死了，誰(shuí)還會(huì)象我一樣愛(ài)你!
8、任何事我都想和你分享，因?yàn)槌四阄以僖舱也坏搅硪粋€(gè)與我相配的女人。
9、三十年后，如果世界上還有堅(jiān)持這個(gè)詞，我希望它屬于我;三十年后，如果世界上還有感動(dòng)這個(gè)詞，我希望它屬于你。
10、我答應(yīng)不會(huì)讓任何人傷害你，包括我自己在內(nèi)。相信我，我會(huì)給你幸福。
11、只要你愿意，當(dāng)你失落失意的時(shí)候，最需要一個(gè)肩膊的時(shí)候，告訴我，我會(huì)立即出現(xiàn)。
12、佛說(shuō)：跪求520xx年可以等到你愛(ài)的人。但我卻用了620xx年等你，還有一百年人們稱它為“百年好合”。
13、我顛覆了整個(gè)世界，只為了擺正你在我心里的位置，淡漠和華麗訴說(shuō)這最后一個(gè)故事。電影總要結(jié)束，故事總會(huì)結(jié)局，可永遠(yuǎn)沒(méi)什么能取代你在我心里的位置。
14、在你抑郁的時(shí)候，我就是你的開(kāi)心果。在你憂傷的時(shí)候，我愿作你的忘憂樹(shù)!
15、我不會(huì)讓我的愛(ài)，再與我擦肩而過(guò)了!現(xiàn)在我要大聲的告訴你：真的愛(ài)你!
